天正信達(dá)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中洗滌注意事項(xiàng)
以下是天正信達(dá)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中洗滌操作的注意事項(xiàng),綜合關(guān)鍵步驟與優(yōu)化建議:
一、洗滌液配置與選擇
緩沖液配制
使用pH 7.2-7.4的PBST(含0.05%-0.2% Tween-20),避免濃度過(guò)高導(dǎo)致包被物解吸附。
若樣本含金屬離子干擾,可添加1-5mM EDTA增強(qiáng)洗滌效果。
溫度控制
洗液需預(yù)熱至20-30℃,低溫易導(dǎo)致“花板”現(xiàn)象(非特異性殘留)。
二、手工洗滌操作要點(diǎn)
浸泡式洗滌
每孔注滿200-300μL洗液,靜置1-2分鐘并間歇搖動(dòng),重復(fù)3-4次。
拍干時(shí)垂直扣板,避免左右甩動(dòng)導(dǎo)致交叉污染。
流水沖洗式
適用于微量滴定板,水流沖擊孔表面2分鐘可提升洗滌效率。
三、洗板機(jī)使用規(guī)范
參數(shù)設(shè)置
洗滌量需略超包被體積(如350μL/孔),吸液高度調(diào)至距孔底0.5-1mm以減少殘留。
推薦3次循環(huán)洗滌,過(guò)度洗滌可能降低信號(hào)強(qiáng)度。
維護(hù)檢查
每日校準(zhǔn)注液量,殘液量需≤2μL,及時(shí)更換堵塞吸頭。
四、常見(jiàn)問(wèn)題處理
現(xiàn)象 原因 解決方案
高背景信號(hào) 洗滌不或交叉污染 增加洗滌次數(shù)至5-6次,優(yōu)化拍干動(dòng)作
孔間差異大 洗板機(jī)吸液不均 檢查吸頭是否堵塞,調(diào)整抽吸位置居中
板底殘留水漬 拍干不或?yàn)V紙掉屑 使用無(wú)塵吸水紙,最后一次拍干加強(qiáng)力度
五、天正信達(dá)特別提示
封閉后洗滌:使用5% BSA封閉后,需PBST洗滌3次以去除非結(jié)合蛋白。
顯色前處理:最后一次洗滌后需拍干,避免殘留液體稀釋底物。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn),具體請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師。
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