配制培養(yǎng)基培養(yǎng)液時需注意的事項
以下是天正信達配制培養(yǎng)基/培養(yǎng)液時的關(guān)鍵注意事項,綜合實驗操作規(guī)范與質(zhì)量控制要點:
一、基礎(chǔ)配制原則
物料核對?
確認培養(yǎng)基成分名稱、批號及有效期,避免誤用過期或變質(zhì)原料。
水質(zhì)要求?
使用電導(dǎo)率≤25 μS/cm的三蒸水或超純水,避免礦物離子干擾。
二、操作流程控制
溶解與分裝?
含瓊脂培養(yǎng)基需煮沸4-6次至溶解,分裝體積不超過容器容量的80%。
難溶成分(如淀粉)需先用冷水調(diào)勻,再加熱溶解。
pH調(diào)節(jié)?
溶解冷卻至室溫后調(diào)pH,高壓滅菌后pH會下降0.1-0.2,需預(yù)先補償。
動物細胞培養(yǎng)液常用pH 7.2-7.4(酚紅指示鮮紅色)。
三、滅菌與保存
滅菌規(guī)范?
含糖培養(yǎng)基避免121℃長時間滅菌(易焦化),建議115℃ 15-20分鐘。
已添加血清或抗生素的培養(yǎng)基需過濾除菌(0.22 μm濾膜)。
儲存條件?
滅菌后培養(yǎng)基4℃保存≤1周,瓊脂培養(yǎng)基反復(fù)熔化不超過3次。
四、特殊成分處理
成分類型? ?注意事項?
血清? 解凍后56℃ 30分鐘滅活,避免反復(fù)凍融
熱敏感添加劑? 待培養(yǎng)基冷卻至50℃時加入(如抗生素)
指示劑/染料? pH校正后再添加,避免高溫破壞活性
五、質(zhì)控要點
無菌檢查?
每批次培養(yǎng)基需做空白對照,觀察是否有雜菌污染。
性能驗證?
動物細胞培養(yǎng)液配制后靜置30分鐘,檢查是否有沉淀析出。
通過上述措施可顯著提升培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和可靠性,具體參數(shù)需根據(jù)培養(yǎng)對象(細菌、細胞或真菌)調(diào)整。
注:以上資料僅供參考,不作為實際標準,具體請咨詢技術(shù)老師。
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